《肝癌電子雜志》2015 年第 2 卷第 2 期
黃凱文(臺(tái)灣大學(xué)附設(shè)醫(yī)院癌癥微創(chuàng)介入治療中心 臺(tái)灣大學(xué)附設(shè)醫(yī)院外科部暨肝炎研究中心 臺(tái)灣大學(xué)醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)研究所,臺(tái)北 000222)
【摘要】目的 消融治療已成為肝癌的主要的治療工具之一,然而長(zhǎng)在高危區(qū)域如膽管旁,仍然一直是治療死角,消融風(fēng)險(xiǎn)極高且效果不佳。本研究將介紹不可逆電穿孔治療在此一領(lǐng)域的突破,并驗(yàn)證根據(jù)此原理的納米刀治療,對(duì)膽管、血管旁肝癌的治療安全性及有效性。方法 臺(tái)大醫(yī)院于2011~2013 年收集 32 位肝癌病患,腫瘤均位于主要膽管及門脈旁5mm之內(nèi),符合 BCLC 期之A期標(biāo)準(zhǔn),但不適合手術(shù)。這些病人在全身麻醉之下,以超聲導(dǎo)引接受納米刀腫瘤消融,治療方法涵蓋經(jīng)皮穿刺(28人),腹腔鏡下治療(2人)以及開腹消融(2人),共治療 35顆腫瘤,其中肝細(xì)胞癌 32 顆,合并膽管細(xì)胞癌 2 顆,大腸癌肝轉(zhuǎn)移1顆,腫瘤平均大小為2.2cm,使用探針數(shù)量為2~5 針。結(jié)果 病人術(shù)后平均隨訪 22個(gè)月(14~-32個(gè)月),消融區(qū)鄰近血管膽管均無(wú)損傷,其中12顆腫瘤同時(shí)貼近膽囊,15顆貼近胃腸道,術(shù)后也未見膽囊或胃腸道并發(fā)癥,共發(fā)生其他并發(fā)癥兩例(6.2%),完全消融率91.4%,局部復(fù)發(fā)率為6.2%,無(wú)惡化存活期為20.8個(gè)月(14~32個(gè)月),隨訪期間無(wú)人死亡。
結(jié)論 本臨床試驗(yàn)為亞太地區(qū)最早有系統(tǒng)的前瞻性納米刀肝癌臨床研究,結(jié)果證實(shí)不管是經(jīng)皮、開腹或腔鏡下進(jìn)行超聲導(dǎo)引納米刀治療,都不失為一個(gè)安全有效的方法,同時(shí)對(duì)于肝癌、膽管癌或是大腸癌的病例,在本研究中都證實(shí)納米刀有臨床的價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】肝癌;不可逆電穿孔;消融;納米刀
1 介紹
消融治療由于兼具微創(chuàng)(mini-invasive)及根治(radical)兩大優(yōu)點(diǎn),在近年已成為普世接受的主要肝癌療法 [1],隨著微波凝固,多刀頭(multielectrodes)射頻等大范圍消融工具的開展,腫瘤消融的大小上限也逐漸擴(kuò)大,治療時(shí)間日益縮短。在日本、中國(guó)臺(tái)灣等國(guó)家和地區(qū),消融早已取代手術(shù)成為早期肝癌的最常用治療。可惜當(dāng)腫瘤位于某些消融治療死角時(shí),例如靠近膽管、腸胃、肝臟表面等高危區(qū)域,由于劇烈溫度改變會(huì)造成臟器損傷[2],又或是靠近血管處會(huì)降低消融效果[3],均成為了消融治療使用時(shí)的一個(gè)限制,這些民眾也因此被迫放棄有效的消融治療,殊為可惜。
有別于傳統(tǒng)冷熱消融,納米刀另辟蹊徑,運(yùn)用了全新的治療原理:以多只細(xì)針導(dǎo)入的高壓電場(chǎng)在細(xì)胞膜表面產(chǎn)生不可逆電穿孔(irreversible electroporation)效應(yīng),致使場(chǎng)區(qū)內(nèi)細(xì)胞凋亡(apoptosis)[4],而由于此原理并非經(jīng)由高熱,消融區(qū)中組織架構(gòu)及細(xì)胞間質(zhì)仍能保持型態(tài)的完整。這樣的消融方式除了能有效滅除腫瘤之外,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中也已確定治療區(qū)內(nèi)及外圍血管、神經(jīng)、膽管等結(jié)構(gòu)可以保持無(wú)損[5],藉由納米刀,我們因此能夠安全地治療位于高危地區(qū)的腫瘤,同時(shí)得以避免熱沈效應(yīng)(heat sink effect)對(duì)消融范圍的影響,而得以消融鄰近大型血管的肝癌 [6,7]。納米刀的問世,使得消融治療被提升到另一境界,更加安全有效。
2 方法
納米刀系統(tǒng)在2006年取得FDA認(rèn)證,在亞洲濫觴于中國(guó)臺(tái)灣地區(qū),臺(tái)灣大學(xué)附設(shè)醫(yī)院自2010年開始運(yùn)用于肝膽胰腫瘤消融,為了確立此新技術(shù)適當(dāng)?shù)闹委熯m應(yīng)證以及驗(yàn)證其安全性,本院于2011年起進(jìn)行了一個(gè)單中心前瞻性研究,對(duì)于腫瘤鄰近膽管、血管且不適手術(shù)之肝癌病患,在取得知情同意后進(jìn)行納米刀消融治療,術(shù)后每 3 個(gè)月隨訪。本研究收案適應(yīng)證如下:病患肝硬化程度為Child A-B,肝癌位于總膽管或是左右肝內(nèi)膽管5mm以內(nèi),同時(shí)距門脈或左右門脈5mm以內(nèi)者,腫瘤大小5cm之內(nèi),數(shù)量3顆之內(nèi),無(wú)肝臟外惡性腫瘤存在,無(wú)凝血不良異常,無(wú)心臟病史,無(wú)體內(nèi)金屬植入物如起搏器或金屬支架,同時(shí)也必須通過全身麻醉風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。本研究經(jīng)由臨床試驗(yàn)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),并注冊(cè)于clinicaltrials.gov (201010036D)。主要研究終點(diǎn)為納米刀治療肝癌后之安全性及有效性,次要終點(diǎn)則為治療后之復(fù)發(fā)率以及存活率。
在治療過程方面,所有治療皆是使用2.1版本納米刀主機(jī)(Nanoknife system; Angiodynamics, NY),以及 2~6只19G 的治療探針,使用電壓上限為3000伏特,電流上限為50安培,每?jī)舍橀g之脈沖數(shù)量為90~180次,電脈沖長(zhǎng)度為70微秒[8-10]。以這些探針平行插入腫瘤或腫瘤外圍,形成一高壓電場(chǎng)包覆住整個(gè)腫瘤,以進(jìn)行治療,有未竟之處則另行移動(dòng)針位,直至整個(gè)腫瘤含周圍5~10mm安全范圍均被消融為止。
治療期間病患必須全程接受全身插管麻醉及深度肌肉松弛處理,否則電脈沖將引起肌肉劇烈收縮損傷及針尖移位等危險(xiǎn),同時(shí)每個(gè)電脈沖必須經(jīng)由心律同步器(synchronizer; AccuSync, Milford, CT, USA)導(dǎo)引[11],跟隨心跳在心博不反應(yīng)期放送,以減少誘發(fā)心律不整的危險(xiǎn)[12],治療期間均由麻醉科醫(yī)師嚴(yán)格監(jiān)控。
探針置入方式可為經(jīng)皮穿肝操作、開腹操作以及腹腔鏡下操作,整個(gè)下針過程都在超聲導(dǎo)引下進(jìn)行。而下針方式之選擇為根據(jù)影像導(dǎo)引的清楚程度來(lái)決定。本研究中所使用之探針原則上針尖長(zhǎng)度2cm,兩針之針距為2cm,釋放電壓為1500V/cm,這也是臨床上最適合肝癌消融之參數(shù)組合[13],不過這些參數(shù)仍會(huì)因?qū)嶋H上腫瘤與外圍組織相關(guān)位置或是根據(jù)電擊效果而有所調(diào)整。經(jīng)由主機(jī)軟件之仿真消融范~圍,可決定所需使用的探針數(shù)量以及下針位置(圖 1),術(shù)者必須調(diào)整針位,用針數(shù)量以及相關(guān)參數(shù)來(lái)使得模擬消融區(qū)能涵蓋腫瘤,如此方可開始進(jìn)行不可逆電穿孔治療 [14,15] 。當(dāng)然下針之后也務(wù)必確保各針體保持齊頭平行,同時(shí)針尖沒有穿刺經(jīng)過血管,同時(shí)最好離開臟器及管道5mm以上。針尖不平行將導(dǎo)致不可逆電穿孔區(qū)范圍縮小,增加局部復(fù)發(fā)率[16],而穿刺血管有術(shù)后出血之風(fēng)險(xiǎn),納米刀針體在反復(fù)消融之時(shí),有時(shí)溫度會(huì)上升,距離臟器及管道太近有熱損傷之虞。在本研究中,所用針數(shù)平均為3.5±0.88枚(2~5枚)。
圖 1 依腫瘤形狀大小(黃圈),軟件會(huì)建議我們使用探針數(shù)(4針),以及布針方式,在設(shè)定參數(shù)完畢后,將提供消融區(qū)范圍的建議(灰圈)
本研究中所使用的平均電壓為每對(duì)電極2370伏特(1800~3000V),平均電脈沖次數(shù)為每對(duì)電極135次(90~180 次)。治療結(jié)束后可直接拔除探針,無(wú)須進(jìn)行針道消融及額外止血處置,所有病人過程生命跡象穩(wěn)定,術(shù)中有26 個(gè)病患出現(xiàn)20~30mmHg之收縮壓上升,均在脈沖結(jié)束后恢復(fù)。
術(shù)后一天內(nèi)收集尿液檢查,心電圖,并進(jìn)行全血細(xì)胞計(jì)數(shù)、血清生化、電解質(zhì)、甲胎蛋白及肌肉酵素分析,首周內(nèi)每2天進(jìn)行一次,2周及1個(gè)月后進(jìn)行兩次計(jì)算機(jī)斷層檢查以偵測(cè)并發(fā)癥有無(wú),術(shù)后每3個(gè)月進(jìn)行一次隨訪。成功消融(technical success)是指術(shù)中所有下針電極對(duì)之預(yù)計(jì)治療脈沖數(shù)均能成功完成,消融范圍涵蓋腫瘤,且術(shù)后3個(gè)月內(nèi)顯示腫瘤及外圍區(qū)域增強(qiáng)消失,而局部復(fù)發(fā)(local recurrence)以術(shù)后造影影像在消融區(qū)外圍1cm之內(nèi)出現(xiàn)存活病灶來(lái)判定。
3 結(jié)果
2011年至2013年本研究總共收案32位病人,22為男性,10位女性,平均年齡為58.6歲(表1),14人為乙型肝炎患者,10人為丙型肝炎患者,肝硬化程度 Child-Pugh Score A級(jí)為20人,B級(jí)為12人,6人為復(fù)發(fā)性肝癌,其中4 人接受過手術(shù)治療,4人接受過射頻消融,2人因阻塞性黃疸于總膽管內(nèi)置放塑料質(zhì)支架,至術(shù)前所有病患膽色素均正常,平均甲胎蛋白血中濃度為224.5ng/ml(18~533ng/ml)。
表1 病人基本數(shù)據(jù)
病患共進(jìn)行35次納米刀治療(其中3人有2顆腫瘤),其中28人進(jìn)行經(jīng)皮治療,2人開腹治療,2人于腹腔鏡下治療,平均隨訪期為22個(gè)月(14~32 個(gè)月),術(shù)后病理證實(shí)2人為肝癌合并膽管細(xì)胞癌,1人同時(shí)有1顆肝癌,1顆大腸癌肝轉(zhuǎn)移,故本研究中共治療肝細(xì)胞癌32顆,合并膽管細(xì)胞癌2顆,轉(zhuǎn)移性大腸癌1顆。腫瘤大小平均為2.2cm(1.0~4.4cm),85.7%(30/35)的腫瘤小于3cm。其中有12顆腫瘤同時(shí)貼近膽囊5mm之內(nèi),有11顆貼近大小腸壁,4顆貼近胃壁。
經(jīng)皮穿肝治療消融時(shí)間主要還是跟下針數(shù)量有關(guān),平均下針時(shí)間為11分鐘(5~19 分鐘),納米刀治療時(shí)間為36 分鐘(12~46 分鐘),和開腹治療下針與治療時(shí)間無(wú)差異,腹腔鏡導(dǎo)引下針時(shí)間延長(zhǎng)為21分鐘(18~24分鐘),而治療時(shí)間則無(wú)異。
在治療中超聲下可見高回音氣泡聚集在探針周圍,術(shù)后30分鐘內(nèi)有部分腫瘤出現(xiàn)低回音變化,但大多數(shù)腫瘤在術(shù)后初期無(wú)超聲學(xué)上影像改變。30分鐘后,80%(28/35)的消融區(qū)會(huì)出現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)高回音外圈,可能為周圍水腫所致。
納米刀成功消融率為91.4%(32/35),其中一位病患雖完成消融,但影像上無(wú)變化,事后證實(shí)為機(jī)組故障,腫瘤也未完全消融。另兩位肝癌病患經(jīng)皮治療術(shù)后3個(gè)月證實(shí)未完全消融,雖然術(shù)后甲胎蛋白曾下降至正常,且治療1個(gè)月后之影像均無(wú)殘余腫瘤跡象,由此可知納米刀治療近期內(nèi)造影影像并無(wú)法正確診斷成功與否。這兩位病患的腫瘤均大于為4cm,各使用了5根探針治療,此3位病患均再次接受納米刀或是射頻消融治療并完全消融。
術(shù)后疼痛方面輕微,經(jīng)皮及腹腔鏡治療者僅使用acetaminophen(1000mg/d)1~4 天,兩名開腹病患使用hydromorphone針劑(10mg)注射2及3次,之后各使用acetaminophen4天即可,術(shù)后住院日數(shù)于經(jīng)皮及腹腔鏡治療病患平均為1.5天(1~4天),開腹病患為4天(3~5 天)。術(shù)后所有病患無(wú)出血,無(wú)感染,無(wú)氣胸或臟器受損癥狀,一位開腹病患出現(xiàn)中量右側(cè)胸水,呈現(xiàn)微喘,經(jīng)抽取后改善,另一位肝硬化病患在經(jīng)皮術(shù)后出現(xiàn)腹水,于術(shù)后7天就醫(yī),經(jīng)保守療法后改善出院??傆?jì)90天內(nèi)并發(fā)癥發(fā)生率為6.2%(2/32),無(wú)嚴(yán)重并發(fā)癥,無(wú)死亡例。
2位出現(xiàn)并發(fā)癥病患均為乙肝患者,肝硬化B級(jí),均有糖尿病病史,均為肝臟手術(shù)后復(fù)發(fā)病患,腫瘤一在第四段,大小為2.8cm,開腹下以4只探針進(jìn)行治療,一在第七段,大小為3.2cm,以5只探針進(jìn)行經(jīng)皮治療。由于并發(fā)癥數(shù)量太少以致難以分析,不過,可見病毒性肝硬化病患,具糖尿病病史,曾經(jīng)手術(shù)切除后復(fù)發(fā)者,進(jìn)行開腹式治療,大腫瘤及使用多探針?biāo)坪踺^好發(fā)并發(fā)癥。術(shù)后血液分析可見首日低度白血球上升,總膽紅素值上升0.6 mg/dl (0.2~1.3mg/dl),AST 上升90IU/L(45~792IU/L),ALT上升122IU/L(59~875IU/L),alkaline phosphatase上升12IU/L(-2~145IU/L),肌肉酵素creatine kinase上升達(dá)140IU/L(12~210IU/L),但96.9%病患均在7日內(nèi)恢復(fù)正常。其他術(shù)后心電圖變化,腎臟功能指數(shù)或是尿液分析均為正常,一個(gè)月內(nèi)影像上未見膽管受損跡(圖2),也無(wú)肝臟缺血壞死區(qū)出現(xiàn),但無(wú)肝內(nèi)膿瘍出現(xiàn)。
圖2 62 歲男性肝癌病患在接受手術(shù)及射頻消融后于總膽管及門脈旁復(fù)發(fā),(A)3cm×2.8cm 大小腫瘤(箭頭處)直接貼近肝門;B)消融后6個(gè)月腫瘤消失,消融區(qū)縮小明顯,鄰近膽管無(wú)擴(kuò)張
平均整體存活期為22個(gè)月(14~32 個(gè)月),2個(gè)病人在術(shù)后第6及第9個(gè)月發(fā)現(xiàn)局部復(fù)發(fā)(6.2%),2個(gè)病人在第9及第18個(gè)月于肝內(nèi)他處出現(xiàn)復(fù)發(fā)(6.2%),這4個(gè)病人均接受后續(xù)射頻消融治療成功,所有病患無(wú)惡化存活期為 20.8 個(gè)月(14~32個(gè)月)。
本研究中所治療之腫瘤均貼近血管,隨訪期間也未見血管狹窄或栓塞(圖3),影像上也未見受波及膽管進(jìn)一步擴(kuò)張或狹窄,只有一位在第9個(gè)月出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)的病患,出現(xiàn)輕微膽管擴(kuò)張,但無(wú)膽紅素上升之異常。在12個(gè)貼近膽囊及15個(gè)貼近腸胃壁的腫瘤消融之后,僅有一位(8.3%)在術(shù)后超聲中出現(xiàn)無(wú)癥狀的膽囊壁水腫,而在1個(gè)月后改善,無(wú)任何腸胃道受損或消化受影響的跡象。兩人術(shù)前曾放置膽管內(nèi)塑料質(zhì)支架,術(shù)后移除時(shí)經(jīng)檢視支架無(wú)損傷,移除后也不再黃疸。
圖3 55 歲男性肝癌病患在接受射頻消融后右肝靜脈及右側(cè)門脈旁復(fù)發(fā),(A)2cm×1.5cm 大小腫瘤(箭頭處)直接侵犯右肝靜脈;(B)消融后 6 個(gè)月血管內(nèi)及血管側(cè)腫瘤消失,僅余前度射頻消融遺跡,鄰近血管無(wú)損傷
4 討論
納米刀是一個(gè)相對(duì)新穎的消融工具[17],在許多臨床前及臨床研究中均提出有可能保全腫瘤周邊重要結(jié)構(gòu)以及避免熱沈效應(yīng)[4,18-20]。而所運(yùn)用的電穿孔效應(yīng)(electroporation),指的是細(xì)胞膜在非常快速,高電壓的多次電脈沖下,出現(xiàn)穿孔,以致通透性改變的過程[21-23],當(dāng)供給電壓夠高,脈沖夠長(zhǎng)之時(shí),會(huì)出現(xiàn)不可逆電穿孔效應(yīng),讓細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡[23],不過一旦電壓過大,則會(huì)出現(xiàn)高熱,致使組織受熱凝固性壞死[45],如此則完全失去電穿孔效應(yīng)的意義。所以納米刀治療技術(shù)能不能達(dá)到最佳的不可逆電穿孔效應(yīng),取決于術(shù)者必須調(diào)整脈沖數(shù)量、電壓、脈沖長(zhǎng)度、電極位置和數(shù)目等多種參數(shù),相對(duì)比傳統(tǒng)消融復(fù)雜。
Al-Sakere[24]最早證實(shí)不可逆電穿孔治療可以用來(lái)消融腫瘤,該團(tuán)隊(duì)成功治療了小鼠皮下肉瘤,同樣的成效在其他疾病模式如肝癌也被證實(shí)[25],而接著在Charpentier和其他專家的若干豬只實(shí)驗(yàn)中則觀察到本療法似乎不會(huì)造成嚴(yán)重的膽管損傷及黃疸[20,21,26]。這些結(jié)果都鼓勵(lì)了后來(lái)醫(yī)師將之使用在高危位置腫瘤消融上。Thomson[27] 在2011年最早提出臨床上安全性相關(guān)報(bào)告,他整理了38個(gè)各種不同腫瘤治療經(jīng)驗(yàn),證實(shí)納米刀治療之副作用效果都是可接受的。而在2014年Silk也發(fā)表研究指出以納米刀治療轉(zhuǎn)移性肝腫瘤對(duì)鄰近1cm內(nèi)膽管影響有限[28]。
本研究則聚焦在貼近主要膽管及血管的原發(fā)性肝癌消融上,我們證實(shí)即使腫瘤僅距膽管血管5mm之內(nèi),沒有任何膽管或血管在納米刀治療后出現(xiàn)變化,同時(shí)也沒有出現(xiàn)相關(guān)癥狀,生化指標(biāo)均只有短期的變化,其他安全指數(shù)如腎臟功能、血細(xì)胞數(shù)量均未見受影響,術(shù)后也未見心電圖異常以及肌肉酵素上升。病患中僅有2人出現(xiàn)中度以下并發(fā)癥(6.2%),同時(shí)無(wú)死亡病例,可見在適當(dāng)?shù)氖褂孟拢{米刀對(duì)肝癌病患即使是有 Child B級(jí)肝硬化,安全性是可以確認(rèn)的。而這并發(fā)癥比例,和在安全位置進(jìn)行射頻消融相差無(wú)幾[29]。
在治療效果方面,本研究中治療對(duì)象均為5cm以下,貼近血管之肝癌,而整體結(jié)果比之前 Narayanan 團(tuán)隊(duì)發(fā)表同樣經(jīng)皮納米刀治療結(jié)果為佳(無(wú)惡化存活11.6個(gè)月)[11],由于病患數(shù)量不夠多,我們無(wú)法判斷不同治療途徑對(duì)并發(fā)癥以及治療效果的差別,然而根據(jù)其他研究指出[18,27],經(jīng)皮似乎比開腹消融有較高的局部復(fù)發(fā)機(jī)會(huì),例如 Cannon[16]和Silk[28]主要以經(jīng)皮計(jì)算機(jī)斷層導(dǎo)引進(jìn)行,出現(xiàn)40%~50% 的局部復(fù)發(fā)率,而Kingham等人[18] 以外科方法為主進(jìn)行肝癌納米刀治療,卻能達(dá)到6%局部復(fù)發(fā)率。雖然本研究絕大部分病患接受超聲導(dǎo)引納米刀治療,完全消融率以及局部復(fù)發(fā)率都接近以外科方法進(jìn)行的治療結(jié)果,這顯示經(jīng)皮超聲應(yīng)該也是一種精準(zhǔn)可行的納米刀導(dǎo)引工具,而且能提供更低的治療侵入性。
綜觀納米刀治療有幾個(gè)與傳統(tǒng)消融相異的特點(diǎn) :第一,納米刀系統(tǒng)治療時(shí)病人需要接受全身插管麻醉以及完全肌肉松弛處理[9]。其二是治療相對(duì)昂貴,所以僅建議使用于傳統(tǒng)消融不適合之部位。第三是下針技術(shù)難度較高,納米刀僅19G 粗,針身柔軟,維持穩(wěn)定直進(jìn)不易,同時(shí)使用時(shí)必須多針平行下針。第四為所需應(yīng)用的參數(shù)繁多,主機(jī)操作的復(fù)雜度,遠(yuǎn)大過傳統(tǒng)冷熱消融,稍有失調(diào),不是效果不好,便是發(fā)熱產(chǎn)生副作用[30-34]。最后,納米刀治療范圍與傳統(tǒng)消融比較下顯得較小,在目前有限的臨床經(jīng)驗(yàn)中,已經(jīng)得知納米刀較適于用來(lái)治療小于3cm 的腫瘤[14,16],3cm以上完全消融率也低,并發(fā)癥也高,這是目前還無(wú)法克服的部分[16,27,35]。
5 結(jié)論
在這個(gè)前瞻性臨床試驗(yàn)中,我們對(duì)貼近膽管的肝癌進(jìn)行超聲導(dǎo)引納米刀消融,其中大部分病患為經(jīng)皮穿肝操作,少部分為開腹操作或腹腔鏡下進(jìn)行,在全身麻醉及肌肉松弛下,與心律同步地進(jìn)行每次電擊治療。術(shù)后并發(fā)癥比例甚低,完全消融率及局部復(fù)發(fā)率可與位在安全區(qū)域腫瘤進(jìn)行傳統(tǒng)熱消融的結(jié)果比肩。我們認(rèn)為在熟練的操作及對(duì)不可逆電穿孔原理通盤了解的準(zhǔn)備下,納米刀對(duì)肝癌將是安全,且療效優(yōu)良的工具。
參考文獻(xiàn)
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收稿日期 :2015-03-12